PS Capture™ エクソソームフローサイトメトリーキット
PS Capture™ Exosome Flow Cytometry Kit
- 遺伝子研究用
-
for Genetic Research
- 製造元 :
- 富士フイルム和光純薬(株)
- 保存条件 :
- 冷凍 (氷冷輸送)
- 適用法令 :
- 優先評価物質
- GHS :
-
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- 構造式
- ラベル
- 荷姿
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比較
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製品コード
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容量
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価格
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在庫
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300回用
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20以上 |
ドキュメント
キットコンポーネント
300回用
| Exosome Capture Beads | 3 mL x 1本 |
|---|---|
| Washing Buffer (10 x) | 45 mL x 2本 |
| Exosome Binding Enhancer (100 x) | 15 mL x 1本 |
カタログダウンロード
FAQ
キット仕様/構成について
- 本キットにエクソソーム検出用の抗体は含まれていますか。
- 本キットにはエクソソーム検出用の蛍光標識抗体は含まれていません。フルオレセイン結合抗CD63抗体(製品コード: 014-27643)や赤色蛍光色素結合抗CD63抗体(製品コード: 017-27753)、または適切な蛍光標識抗体を別途ご購入の上、ご使用ください。
- MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS Ver.2(製品コード: 290-84103)をフローサイトメトリーに適用することはできますか。
- MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS Ver.2はエクソソーム精製用のキットであり、フローサイトメトリーに適用はできません。PS Capture™ Exosome Flow Cytometry Kit は、磁気ビーズや洗浄バッファーの組成がフローサイトメトリー測定用に最適化されています。
プロトコルについて
- 本キットの操作時間はどのくらいですか。
- サンプル前処理が約1 時間、キット工程が約2 時間20 分です。工程の内訳は、サンプルとの反応が1 時間、蛍光標識抗体によるエクソソームの染色が1 時間、洗浄が約20 分です。
- 検出に用いるサンプルの最低量はどのくらいですか。
- 1 サンプルあたり33 μL程度のサンプルが必要です。サンプルに含まれる細胞外小胞量が少ない場合は、遠心分離前処理済みの培養上清を限外濾過濃縮のうえ、サンプルとしてご使用ください。(推奨フィルター: ザルトリウス社 Vivaspin20、分画分子量100K、メーカーコード: VS2041)
- 蛍光標識二次抗体を用いて検出することはできますか。
- エクソソームを単離後、以下のプロトコールで一次抗体反応、二次抗体反応およびフローサイトメトリー解析を実施してください。
- 未標識の一次抗体とExosome Capture Beads を混ぜて室温で1 時間静置する。その間、20 分、40 分、1 時間のタイミングで5 秒程度ボルテックスし、磁気ビーズを撹拌する。
- 300 μLのWB(+Enhancer)で2 回洗浄する。
- Jackson ImmunoResearch社のPE 標識二次抗体(メーカーコード:115-115-164)をWB(+Enhancer)で100 倍希釈し、2.の磁気ビーズに添加する。
- 室温で1 時間静置する。その間、20 分、40 分、1 時間のタイミングで5 秒程度ボルテックスして、磁気ビーズを撹拌する。
- 300 μLのWB(+Enhancer)で3 回洗浄する。
- 磁気ビーズを300 μLのWB(+Enhancer)に懸濁する。
- フローサイトメーターで解析する。
- 精製済みのエクソソームサンプルを測定する方法はありますか。
- 精製済みエクソソームを適切な濃度に希釈後、取扱説明書の「2. 細胞外小胞の単離」に進んでください。精製エクソソームの希釈には、キット付属のWashing Buffer(10 x)を超純水で10 倍希釈した後ご使用ください。精製エクソソームは、125-1000 ng/mLの濃度で検出できることを確認しております。検出抗体は、抗CD63, モノクローナル抗体(3-13), 赤色蛍光色素(635)結合(製品コード: 011-27751)を推奨します。
- 10 種類程度の抗体で検出をする場合、サンプルと磁気ビーズの必要量はどのくらいですか。
- 取扱説明書の「表2 各反応数における試薬およびサンプルの使用量」をご参照ください。表2の一番下に10 反応のスケールが記載されています。367 μL のサンプルとExosome Capture Beads 110 μLを反応させてエクソソームを単離し、WB(+Enhancer)で洗浄後、WB(+Enhancer) 1,100 μLに磁気ビーズを懸濁してください。その後、「3. 細胞外小胞の染色」にて、100 μLずつ小分けするステップに進んでください。
トラブルシューティングについて
- 複数のExosome Capture Beads とエクソソームが結合することで、磁気ビーズが凝集してしまった場合、正確に測定を行うことはできますか。
- 前方散乱光と側方散乱光のプロットから、シングレットのビーズ画分のみをゲーティングして、ゲート内に含まれるExosome Capture Beadsの蛍光シグナルを検出してください。一般的なサンプルであれば、シングレットのビーズ画分は全体の50-70%確認できます。
- マグネットスタンドに磁気ビーズが集磁されません。
- 本キットのExosome Capture Beads はフローサイトメトリー検出用に最適化されており、磁気ビーズ濃度が低くなっています。そのため、目視では磁気ビーズの集磁を確認しにくい場合があります。洗浄操作を行う際は、チューブをマグネットスタンドに1 分間以上静置した後に、磁気ビーズを吸わないようにゆっくりとピペッティング操作を行ってください。
アプリケーションについて
- 本キットはヒト以外の生物種のエクソソームを検出することはできますか。
- 検出できます。ヒトの他にマウス、ウシ、サルで使用実績があります。
ライセンスについて
- 本キットを営利・商業目的に使用することは可能ですか。
- 本品を営利・商業目的にご使用される場合には、当社お客様相談室（ffwk-labchem-tec@fujifilm.com）までお問い合わせください。
関連製品について
- 磁気スタンドはどのようなものを使用すれば良いですか。
- 当社では以下製品を販売しております。
マグネットスタンド (製品コード: 299-36421)
概要・使用例
| 概要 | 本キットは、細胞培養上清や体液検体に含まれる細胞外小胞をフローサイトメトリーにより定性解析することができる試薬です。細胞外小胞表面のホスファチジルセリン（PS）特異的に結合するタンパク質が固相化された磁気ビーズに細胞外小胞を反応させて固定化した後、任意の細胞外小胞マーカータンパク質に対する蛍光標識抗体を用いることで、細胞外小胞表面のマーカータンパク質を高感度に検出できます。 ご使用前に、各表面マーカータンパク質に対する一次抗体および蛍光色素標識済み二次抗体、または蛍光色素標識済みの一次抗体をご用意下さい。 |
|---|---|
| 構成 | 1) Exosome Capture Beads（294-79711）3 mL×1本 2) Washing Buffer (10×)（291-79721）45 mL×2本 3) Exosome Binding Enhancer (100×)（298-79731）15 ml×1本 |
物性情報
「物性情報」は参考情報でございます。規格値を除き、この製品の性能を保証するものではございません。
本製品の品質及び性能については、本品の製品規格書をご確認ください。
なお目的のご研究に対しましては、予備検討を行う事をお勧めします。
製造元情報
別名一覧
- 掲載内容は本記事掲載時点の情報です。仕様変更などにより製品内容と実際のイメージが異なる場合があります。
- 製品規格・包装規格の改訂が行われた場合、画像と実際の製品の仕様が異なる場合があります。
- 掲載されている製品について
- 【試薬】
- 試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
- 試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
- 【医薬品原料】
- 製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
- 表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
- 表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。
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