レビス® OVA-IgG1 マウス LBIS Mouse anti-OVA-IgG1 ELISA Kit

IgGは血清中の免疫グロブリンの中で最も多く存在し、二次免疫応答の主要な抗体ですが、IgGの2/3を占めるのがH鎖としてγ1を持つ分子量146,000のIgG1です。抗原をOVA(ovalbumin)に特化、単純化して、抗OVA-IgG1抗体価を測定する事によりマウス免疫系の解明が可能となります。

レビス^® OVA-IgG1 マウスは、この目的のためにanit-OVA-IgG1のみを特異的に測定するキットです。

• 特長

  • 短時間(全反応時間：1時間50分)で測定可能
  • 微量な検体で測定可能
  • 環境に優しい防腐剤を使用
  • 全ての試薬が溶液タイプで即座に使用可能
  • 高い測定精度と再現性
  • 簡便な操作で特別な前処理は不要

• 製品情報

  検体

  マウスの血清・血漿　10 μL/well(希釈検体)

  標準曲線範囲

  1.88～120 mU/mL

• 操作法

  OVE固相化96ウェルプレート
  　↓　洗浄3回
  ビオチン結合抗IgG₁抗体　　50 μL
  　↓　攪拌
  希釈検体または標準溶液　　10 μL
  　↓　攪拌、室温、1時間静置反応
  　↓　洗浄3回
  ペルオキシダーゼ・アビジン結合物　　100 μL
  　↓　攪拌、室温、30分静置反応
  　↓　洗浄　3回
  発色液(TMB)　　100 μL
  　↓　攪拌、室温、20分間静置反応
  反応停止液(1 M H₂SO₄)　　100 μL
  　↓　攪拌
  吸光度測定(主波長450 nm、副波長620 nm)

  室温：20～25 ℃

• 標準曲線

  

• 精度試験(アッセイ内変動)

  検体	A	B
  1	105	18.2
  2	100	16.9
  3	96.2	16.7
  4	100	17.4
  5	106	17.4
  mean	101	17.3
  SD	4.0	0.59
  CV(%)	4.0	3.4

  単位：mU/mL

• 再現性試験(アッセイ間変動)

  測定日/検体	C	D	E
  0日目	60.1	15.0	3.75
  1日目	58.5	14.7	3.70
  2日目	59.9	15.3	3.83
  3日目	61.4	15.7	3.82
  mean	60.0	15.2	3.77
  SD	1.2	0.44	0.06
  CV(%)	2.0	2.9	1.6

  単位：mU/mL

添加回収試験

• 検体F

  添加量	実測値	回収量	回収率(％)
  0.00	8.86	-	-
  7.29	15.8	6.94	95.2
  11.0	19.5	10.6	96.4
  14.6	23.0	14.1	96.6

  単位：mU/mL, n=3

• 検体G

  添加量	実測値	回収量	回収率(％)
  0.00	51.5	-	-
  26.9	76.8	25.3	97.1
  31.4	80.6	29.1	92.5
  47.1	100	48.5	103

  単位：mU/mL, n=3

使用文献はこちら。