レビス® OVA-IgE マウス LBIS Mouse anti-OVA-IgE ELISA Kit

IgE (Immunoglobulin E、免疫グロブリンE)は5番目に発見された免疫グロブリンで、ドメイン5個(VH、CHε 1～4)から構成されているHε鎖2本とL鎖2本からなる分子量約190,000の糖タンパク質で、電気泳動的にはγ1領域に移動します。代謝半減期は約3日で、正常人の血清中での濃度はきわめて低く300 ng/mL程度ですが、寄生虫の感染や枯草熱で増加します。アレルギーに関与するIgEはレアギンと呼ばれていますが、アレルゲンで感作された際増加したレアギンは皮膚、呼吸器、消化器などに存在する好塩基性顆粒球や肥満細胞のFcεR1受容体とFc部位で結合し、細胞を感作し、これにアレルゲンが結合すると細胞は脱顆粒を起こしてヒスタミン、セロトニン、プロテアーゼ、ヘパリン、化学走性因子、プロスタグランジン、ロイコトリエン等を放出させ、気管支収縮や粘膜浮腫、分泌高進などにより、気管支喘息、一部のじんま疹、アレルギー性鼻炎、アナフィラキシー等のⅠ型アレルギー反応を惹き起こします。

レビス^® OVA-IgE マウスは、OVA(ovalbumin)を抗原として免疫し、マウス抗OVA-IgE抗体価を測定することにより単純化された反応系でマウス免疫系の検討を行うためのキットです。

• 特長

  • 短時間(全反応時間：1 時間50 分)で測定可能
  • 微量な検体で測定可能
  • 環境に優しい防腐剤を使用
  • 全ての試薬が溶液タイプで即座に使用可能
  • 高い測定精度と再現性
  • 簡便な操作で特別な前処理は不要

• 製品情報

  検体

  • マウスの血清・血漿
  • 10 μL/well(希釈検体)

  標準曲線範囲

  1.88～120 U/mL

• 操作法

  OVE固相化96ウェルプレート
  　↓　洗浄3回
  ビオチン結合抗IgE抗体　　50 μL
  　↓　攪拌
  希釈検体または標準溶液　　10 μL
  　↓　攪拌、室温、1時間静置反応
  　↓　洗浄3回
  ペルオキシダーゼ・アビジン結合物　　100 μL
  　↓　攪拌、室温、30分静置反応
  　↓　洗浄　3回
  発色液(TMB)　　100 μL
  　↓　攪拌、室温、20分間静置反応
  反応停止液(1 M H₂SO₄)　　100 μL
  　↓　攪拌
  吸光度測定(主波長450 nm、副波長620 nm)

  室温：20～25 ℃

• 標準曲線

  

• 精度試験(アッセイ内変動)

  検体	A	B
  1	70.7	19.1
  2	71.0	18.7
  3	77.1	19.6
  4	74.3	19.7
  5	72.9	18.9
  mean	73.2	19.2
  SD	2.6	0.42
  CV(%)	3.6	2.2

  単位：U/mL

• 再現性試験(アッセイ間変動)

  測定日/検体	C	D	E
  0日目	60.0	15.0	3.75
  1日目	59.1	15.0	3.75
  2日目	58.1	14.7	3.65
  3日目	63.6	16.0	3.48
  mean	60.2	15.2	3.66
  SD	2.4	0.57	0.13
  CV(%)	4.0	3.7	3.4

  単位：U/mL

添加回収試験

• 検体F

  添加量	実測値	回収量	回収率(％)
  0.00	6.93	-	-
  5.35	12.2	5.27	98.5
  10.7	17.8	10.9	102
  17.1	25.5	18.2	106

  単位：U/mL, n=3

• 検体G

  添加量	実測値	回収量	回収率(％)
  0.00	40.5	-	-
  30.8	70.4	29.5	95.8
  35.9	77.1	36.6	102
  53.9	94.9	54.4	101

  単位：U/mL, n=3

使用文献はこちら。